Как приготовить постоянный микропрепарат?

[Игорь Загинайло]

здорово! скажите, такое фото на ЛОМОвском иммерсионном объективе получится или это у Вас какой-то модный план-апохромат? какое увеличение окуляра?

Честно говоря, не помню какой был объектив (фото не вчерашнее), кажется, обычный ахромат ЛОМО 90х/1.25, но, может быть, и апохромат CZJ 90х/1.30. Точно могу сказать, что сверху иммерсия была маслянная, а снизу (на конденсоре) - глицериновая; это такое мое "ноу-хау": от глицерина отмывать конденсор гораздо проще, чем от масла, да и чистый глицерин лучше держится на фронтальной линзе, меньше стекает по корпусу. Съемка без окуляра: камера монтируется на место окулярной насадки. Важно: освещение по Келеру, именно оно дает насыщенность цвета.

...позавчера приготовил монтирующую среду на основе канифоли и ксилола (1 г к 1.5 мл), сначала вся канифоль растворилась, но сегодня утром обнаружил что часть выкристаллизовалась. видимо таким насыщенным раствором пользоваться и буду, т.к. вязкость и так маловата, а концентрацию больше чем у насыщенного раствора получить нельзя.

Из моего опыта (растворял канифоль в уайт-спирите): очень долго сохнет. Возможно, стоит подогревать среду (больше растворится) и препарат во время отвердения среды. Если Вы химик, то как работать с ксилолом, наверное, знаете.

[Игорь Загинайло]

Силикат-глицериновая среда (показатель преломления 1,48), предложена Д.Н. и Н.А. Анели (1978): 100 г. конторского силикатного клея смешивают в стеклянной посуде с 20 мл. дистиллированной воды, после чего к смеси прибавляют 20 мл. глицерина и взбалтывают в течение 2-3 мин. Готовый состав хранят в склянках или банках с притертыми пробками. Среда хорошо сохраняет зеленый цвет хлоропластов без предварительной фиксации. Для окрашенных препаратов среда непригодна. Готовые препараты лучше окантовать.

PS: о подготовке препарата и процедуре заключения ничего не пишется, но, по логике вещей я бы предположил:
а) инфильтрацию в воде (с помощью вакуум-эксикатора или в шприце) - воздух вытесняется водой
б) поводку от воды через смесь воды и глицерина к глицерину
в) сушку на нагревательном столике или в термостате
г) окантовку чистым конторским клеем.

Такую смесь грибок точно харчить не станет.

[Igor Tkachenko]

спасибо за рецепт!

[Игорь Загинайло]

Попобовал Ваш вариант: канифоль в ксилоле. Растворял на нагревательном столике (ок 80 градусов). Действительно, консистенция жидковата, хотя гуще, чем в холодном растворителе. И высыхает на нагревательном столике норамльно.

Для примера сделал эпидерму листа тюльпана (с весны плавала в фиксаторе). Окрасил хризоидином и водным синим, после "по быстрому" провел через 2 смены изопропанола и 2 смены ксилола (надо бы минимум по 3 смены) и заключил. Канифоль, конечно, желтит препарат (желтый цвет в устьицах - это хризоидин, а общий фон - это от канифоли)

Просмотров: 3457

[Igor Tkachenko]

попробовал сделать препарат на канифоли, в итоге под покровным стеклом начали расти кристаллы наверное канифоль какую-то не такую купил

Просмотров: 3456

[Игорь Загинайло]

Понаблюдаю за своими канифольными препаратами. Но смола (а канифоль - сосновая смола) не должна кристаллизоваться. Они точно растут, или Вы их просто обнаружили? А что за покровные стекла? Я когда-то нарвался на китайские, у которых на поверхности было что-то похожее.

[Владимир Деркач]

У меня с канифолью была та же беда. Росли кристаллы. Если подогреть пропадают, но есть опасность угробить препарат.

[Igor Tkachenko]

со стеклами точно все в порядке. а кристаллы появляются со временем, при нагревании исчезают, но потом опять появляются

[Игорь Загинайло]

Замонтировал препарат утром, пока никаких намеков на кристаллизацию. Как быстро у вас начинается кристаллизация?

У меня канифоль старая, еще советских запасов; может новая - не канифоль в чистом виде, а с какими-то присадками для лучшего залуживания, Бог его знает.

Есть еще возможность монтровать в пластмассы, проще всего - в полистирол, вот один рецепт (я его не пробовал):

Вместо канадского бальзама можно использовать полистирол, который применяется в упаковке или для одноразовой посуды (убедитесь, что это полистирол, должно быть указано на упаковке). 30 г, пластика смешивают с 70 мл, ксилола, можно перемешивать для ускорения растворения или оставить он сам раствориться, полученная смесь должна иметь консистенцию меда. Далее к 30% раствору полистирола добавляют с 6 мл дибутилфаталата (ДБФ, пластификатор, продается на рынках стройматериалов) и тщательно перемешивают. Если раствор слишком густой прилить ксилол, если жидкий добавить пластик. Если не добавлять ДБФ со временем пластик начнет покрываться трещинами, станет хрупким и белесоватым .
Готовую синтетическую смолу хранят в плотно закрытой посуде. Технология заключения препаратов та же, что и при применении других сред для заключения.

Смола не смешивается с водой, по этой причине объект, который вы собираетесь заключить, должен быть обезвожен, можно использовать изопропиловый спирт (абсолютированный ), купить можно на радио рынках или магазинах. Объект лучше выдержать несколько дней, а затем перенести его в чистый ксилол(10-12 часов), из которого его можно монтировать на предметное стекло и помещать в смолу. Препараты хранятся долго.

Коэф. прелом. полистирола ок. 1,52

Если кто попробует - отпишитесь, плз.

[Igor Tkachenko]

кристаллы растут где то через минут 40 после монтирования.
попробую с полистиролом, только надо коллег развести на какой-то диалкилфталат